精準檢測，洞悉生命 - 上海心語生物科技有限公司

（心語檢測(XinYu BioDetect），您的可靠科研伙伴

ELISA試劑盒的典型組成：

一個標準的ELISA試劑盒通常包含以下組件：

1、預包被微孔板： 96孔或48孔塑料板，孔內已預先包被好捕獲抗體或抗原（根據類型而定）。這是反應發生的場所。

2、酶標二抗（或酶標檢測抗體/抗原）： 根據ELISA類型，提供辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶標記的二抗（用于間接法或夾心法），或酶標抗原（用于競爭法）。

3、標準品： 已知精確濃度的抗原（或抗體）系列梯度溶液。用于繪制標準曲線，計算樣本中待測物的濃度。

4、檢測抗體（僅夾心法）： 未標記的、針對抗原另一表位的抗體。

5、樣品稀釋液： 用于稀釋樣本，使其基質與標準品和緩沖體系匹配，減少非特異性干擾。

6、洗滌緩沖液： 通常為含吐溫-20的磷酸鹽緩沖液。用于在各步驟之間洗去未結合的物質，減少背景干擾。洗滌是否是實驗成敗的關鍵！

7、封閉液： 常用牛血清白蛋白或脫脂奶粉溶液。用于在包被后封閉微孔板上未結合的位點，防止后續步驟中的非特異性吸附，降低背景。

8、底物溶液：

對于HRP：常用四甲基聯苯胺或3,3',5,5'-四甲基聯苯胺。

對于AP：常用對硝基苯磷酸酯。

9、終止液：

對于HRP-TMB：常用稀硫酸溶液。

對于AP-pNPP：常用氫氧化鈉溶液。用于終止酶促反應，穩定最終顏色。

10、板封膜： 在孵育步驟中覆蓋微孔板，防止蒸發和污染。

11、說明書： 詳細的操作步驟、試劑保存條件、注意事項、預期結果和標準曲線繪制方法等。

樣本處理及要求：

1. 血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織,剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4. 細胞培養物上清：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

5. 其它生物標本：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測。

6. 樣品外觀：樣品應清澈透明，懸浮物應離心去除。

7. 樣品保存：樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個月內檢測），或-80℃（6個月內檢測），避免反復凍融，標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

人S100鈣結合蛋白BELISA試劑盒相關產品：

心語檢測(XinYu BioDetect)   人瘤變抑制因子14(ST14)ELISA試劑盒   英文名：Human ST14 ELISA Kit

心語檢測(XinYu BioDetect)   人肝受體同源物1(LRH1)ELISA試劑盒   英文名：Human LRH1 ELISA Kit

心語檢測(XinYu BioDetect)   人精氨基琥珀酸合成酶1(ASS1)ELISA試劑盒   英文名：Human ASS1 ELISA Kit

心語檢測(XinYu BioDetect)   人死亡誘導終結因子1(DIDO1)ELISA試劑盒   英文名：Human DIDO1 ELISA Kit

心語檢測(XinYu BioDetect)   人興奮性氨基酸轉運蛋白3(EAAT3)ELISA試劑盒   英文名：Human EAAT3 ELISA Kit

心語檢測(XinYu BioDetect)   人含膠原三螺旋重復蛋白1(CTHRC1)ELISA試劑盒   英文名：Human CTHRC1 ELISA Kit